【摘 要】
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目的构建人Nur77基因的慢病毒表达载体,建立稳定表达Nur77基因的CNE-2Z细胞株。方法根据人Nur77序列设计并合成引物,以CNE-2Z细胞c DNA为模板,通过PCR扩增目的基因。双酶切目
【基金项目】
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广东省自然基金项目（编号：10452402301006027）
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目的构建人Nur77基因的慢病毒表达载体,建立稳定表达Nur77基因的CNE-2Z细胞株。方法根据人Nur77序列设计并合成引物,以CNE-2Z细胞c DNA为模板,通过PCR扩增目的基因。双酶切目的基因并插入pCDH-EGFP-G4S-MCS质粒,对重组质粒进行慢病毒包装并感染CNE-2Z细胞,而后通过荧光筛选阳性表达细胞单克隆。结果重组质粒经测序分析确定无误,包装慢病毒颗粒后感染CNE-2Z细胞,通过荧光筛选及Western blot验证得到Nur77稳定过表达的CNE-2Z细胞株。结论成功构建pCD
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