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目的建立测定三黄片中大黄素和大黄酚总含量的不确定度评定方法。方法采用《中国药典》2005年版一部三黄片中的HPLC法测定大黄素和大黄酚总含量，分析影响其不确定度的因素来源，对各个不确定度因素进行评定，并计算合成不确定度，最终给出测量结果的扩展不确定度和置信水平。结果合成不确定度为1．7×10^-2；扩展不确定度为3．4×10^-2。结论本方法可用于HPLC法测定药物含量的不确定度的分析，使测定结果更加可靠。