红景天苷抑制骨肉瘤143B细胞侵袭、迁移及其机制研究

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Lynn_lin
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目的

探讨红景天苷对人骨肉瘤143B细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其机制。

方法

杜尔伯科改良伊格尔培养基(DMEM,含10%血清及1%双抗)培养骨肉瘤143B细胞,实验分组为对照组、30、60 μmol/L红景天苷处理组。噻唑蓝(MTT)实验检测各组24、36、72 h的细胞增殖活性;处理24 h后,采用Transwell法检测3组细胞的侵袭能力;处理24 h后采用划痕实验检测各组细胞迁移能力,计算细胞迁移率。3组细胞在处理24 h后,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的mRNA相对表达水平变化,Western blot实验检测各组细胞MMP-2、MMP-9的蛋白表达水平。透射电镜检测处理24 h后的细胞自噬体。

结果

处理24 h后,60 μmol/L组(0.038±0.002)和30 μmol/L组(0.054±0.002)143B细胞吸光度值低于对照组(0.074±0.004,t=2.659,P=0.016; t=1.993,P=0.039)。处理48、72 h后,与对照组比较,浓度为30、60 μmol/L的红景天苷组143B细胞吸光度值同样分别低于对照组,呈剂量依赖和时间依赖性。60 μmol/L[(48.7±8.2)个]和30 μmol/L[(76.8±12.8)个]红景天苷组143B细胞跨膜数目分别少于对照组[(94.5±11.9)个,t=8.056,P=0.000;t=2.472,P=0.038]。60 μmol/L[(52.9±6.8)%]和30 μmol/L[(82.6±3.7)%]红景天苷组143B细胞迁移率分别低于对照组[(98.7±0.3)%,t=12.576,P=0.000;t2=9.794,P=0.000]。60 μmol/L和30 μmol/L红景天苷处理组MMP-2、MMP-9的蛋白和mRNA相对表达量分别低于对照组。60 μmol/L红景天苷实验组自噬体形成数目[(2.6±0.5)个]多于对照组[(1.3±0.4)个,t=3.517,P=0.025]。

结论

红景天苷抑制了骨肉瘤细胞增殖、迁移、侵袭,其机制可能与诱导自噬及抑制MMP家族蛋白表达相关。

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