【摘 要】
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摘要:用昆虫杆状病毒表达系统表达了高致病性禽流感H5N1 HA蛋白,經SDS-PAGE和Western blot检测,HA蛋白表达分子量约为70 ku;将HA蛋白制成油乳液,免疫BALB/c小鼠,免疫3次后,收集血清,以血凝抑制试验(HI)和血清IgG抗体酶联免疫吸附试验(ELISA)评估体液免疫,酶联免疫斑点试验(ELISPOT)评估细胞免疫。试验结果表明:重组HA蛋白组和全病毒灭活疫苗组免疫小
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摘要:用昆虫杆状病毒表达系统表达了高致病性禽流感H5N1 HA蛋白,經SDS-PAGE和Western blot检测,HA蛋白表达分子量约为70 ku;将HA蛋白制成油乳液,免疫BALB/c小鼠,免疫3次后,收集血清,以血凝抑制试验(HI)和血清IgG抗体酶联免疫吸附试验(ELISA)评估体液免疫,酶联免疫斑点试验(ELISPOT)评估细胞免疫。试验结果表明:重组HA蛋白组和全病毒灭活疫苗组免疫小鼠后,血清中和抗体效价及ELISA IgG效价均显著高于PBS 组,重组HA蛋白组和全病毒灭活疫苗组之间差异不显著。ELISPOT试验数据显示,重组HA蛋白组和全病毒灭活疫苗组小鼠脾单个核细胞分泌IFN-γ和IL-4细胞数量显著高于PBS组,而重组HA蛋白组和全病毒灭活疫苗组之间差异不显著。用昆虫杆状病毒表达系统表达H5N1 HA蛋白制成油乳液能诱导体液免疫和细胞免疫,能为预防高致病性禽流感H5N1候选疫苗的筛选提供依据。
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1.2.2重组蛋白HA的表达重组的rBacmid-HA通过CellfectinⅡreagent转染进昆虫细胞Sf9。将Sf9细胞置于含有10% FBS(胎牛血清)的Grace昆虫细胞培养基,28 ℃孵育。当6孔板中每孔细胞浓度为1×106个/mL时,让其吸附 1 h。将 1 μg rBacmid-HA(Bacmid空杆粒作为阴性对照)溶于 100 μL 不完全培养基中(不含血清或双抗的Grace培养基);将5 μL Cellfectin溶于100 μL不完全培养基;两者混合均匀在室温孵育 15~45 min后加入Sf9细胞,28 ℃孵育 5 h,弃去转染培养基,加入新鲜培养基。当细胞出现明显病变后(第 1 代约需4 d),收集含病毒的培养上清,即为第一代重组病毒,记为P1。P1代病毒种子液量少、效价低,用 P1继续感染Sf9细胞产生效价高的P2种子液。P2代病毒液感染细胞后,收集感染72 h 后的细胞培养上清直接用于后续检测。细胞用PBS(磷酸盐缓冲液)洗3次,经3次反复冻融后超声破碎,然后在4 ℃、12 000 g 条件下离心 10 min,取上清,用12% SDS-PAGE(十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺)胶进行蛋白电泳检测。
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2.5.2免疫BALB/c小鼠血清中IgG抗体水平检测用间接ELISA检测BALB/c小鼠血清中IgG抗体,结果显示,重组HA蛋白组与全病毒灭活疫苗组IgG抗体均有升高,两者显著高于PBS组(P全文查看链接
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摘要:以75%乙醇为溶剂,采用索氏提取法提取石榴(Punica granatun L.)叶的有效成分,并对该提取物的抑菌作用进行了测定。结果表明,石榴叶提取物对白色葡萄球菌抑菌活性明显,对黑腹果蝇成虫有明显的毒害作用,且毒性效果与浓度呈正相关。石榴叶提取物对槐蚜防治效果明显,当石榴叶提取物浓度为60 mg/mL时,24 h后槐蚜校正死亡率达9672%。石榴叶提取物具有广谱抑菌杀虫活性。 关键词:
在高三英语教学的一年里,教师不仅要完成高三教材的教学。还要指导学生进行高考复习。尤其要强化学生的语言知识运用能力,时间十分紧迫。然而,目前高考英语课堂复习教学层面遭遇到的最大挑战就是无效或低效问题,往往会出现复习教学形式化、低效化现象。在听课调研、与教师座谈交流、对所获得信息进行分析与反思的基础上,笔者试图从正确理解教学有效性的内涵人手。谈谈高考英语复习教学的有效性。 “注:本文中所涉及到的
摘要:对云南省红河州泸西县烟田番茄斑萎病毒属病毒的4种主要传毒蓟马进行药效试验。结果表明,6种杀虫剂对烟田番茄斑萎病毒属病毒传毒蓟马均有一定防效,药后1 d除0.3%苦参碱外的其余5种杀虫剂表现出了较强的速效性,对烟田蓟马的防效均在90%以上;60 g/L乙基多杀菌素悬浮剂与20%螺虫乙酯悬浮剂的持效性较强,药后 7 d 的防效均在82%以上。 关键词:烟田;传毒蓟马;杀虫剂;防治效果 中图分
高中数学新课程标准指出:数学探究是指学生围绕某个数学问题,自主探究、学习的过程.这个过程包括:观察分析数学事实,提出有意义的数学问题,猜测、探求适当的数学结论或规律,给出解释或证明.由此,教师作为引导者在教学中不应是简单的照本宣科,而应切实领会新课改的精神,深入挖掘教材,精心设计教学,从知识的引入、公式的形成、知识的应用等方面艺术地引导学生去诠释知识的内涵与外延,使学生学会探究知识、构建知识网络,
摘要:采用紫外-可见分光光度法测定小驳骨不同提取溶剂、不同部位总黄酮和总酚酸含量及其抗氧化性。结果表明,小驳骨茎总黄酮含量高于叶,茎水提取液总黄酮含量最高,为4.26%;小驳骨叶总酚酸含量高于茎,叶醇提取液总酚酸含量最高,为11.90%;在抗氧化性方面,茎水提液>茎醇提液>叶水提液>叶醇提液;小驳骨不同部位总黄酮、总有机酸含量、抗氧化性存在差异;总黄酮含量和抗氧化性具有相关性,表明抗氧化活性可能与
摘要:西花蓟马是我国重要的入侵害虫之一,为了解其不同地理种群的遗传分化,测定了云南6个地理种群141个个体的mtDNACOⅠ基因片段。结果表明:在比对的433 bp基因片段中,变异位点19个,共检测出5个共享单倍型,单倍型间出现了明显的遗传分化,证实了云南西花蓟马为一个复合种群。地理种群间的遗传距离较低,遗传距离与地理距离无显著相关性。各地理种群西花蓟马的遗传分化指数Fst为-0.021 19,种
概览试卷,感觉变化不大;初做试卷,会知不易不畅;久思试卷,颇有启示收获. 可以说试卷的外形在师生的预想之中,而部分试题则在师生的预料之外,可谓卷面显稳定,题内含变化. 一、稳定的卷面 感觉变化不大即试卷的外形在预料之中及命题以能力立意未变. 1. 体例稳定. 三类题型延用浙江卷特有的“10 7 5”分布,分数设制没有变化. 2. 知识点分布比例未变. 算法,集合,充要条件,复数,
摘要:采用实地调查法、对比分析法和案例分析法,研究了贵州农村地区宅基地退出实践中形成的5种典型模式,分别为:农户异地建新后自发退出并复垦老宅基地模式、农户自愿退出废弃或闲置宅基地政府无偿实施复垦模式、城乡建设用地增减挂钩中引导农户集中居住腾退老宅基地模式、农村危旧房改造限额用地腾退多余宅基地模式、生态移民搬迁腾退老宅基地模式。研究结果表明,城乡建设用地增减挂钩中引导农户集中居住腾退老宅基地模式和生
作为我国一种降海洄游经济性鱼类,近年来由于人类过度捕捞和栖息环境遭到破坏,野生资源量急剧下降。本文从松江鲈鱼表型、染色体、蛋白质(酶)和DNA 4个层面概述其遗传多样性,并分析当前资源现状。为松江鲈鱼种质资源保护和遗传育种研究提供参考。 关键词:松江鲈鱼;群体遗传多样性;种质资源;表型;染色体;蛋白质(酶) 中图分类号: S917文献标志码: A文章编号:1002-1302(2014)10-0
摘要:利用LI-6400便携式光合作用仪对江苏苏州32种园林植物的光合速率和蒸腾速率进行测定,并分析其水分利用特征。其中,垂丝海棠、枫杨、夹竹桃和紫荆4种植物的瞬时光合速率较高,分别为22.21、19.34、19.09、18.27 μmol/(m2·s)。乐昌含笑、桂花、樟树和枫香4种植物的水分利用效率较高,分别为5.23、4.77、4.49、4.26;金叶女贞的水分利用效率最低,只有1.10。