耦合末端盐桥与定点突变的重组腈水合酶催化动力学

来源 :化工学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：lmtc5238

【摘要】

：

双亚基腈水合酶是催化丙烯腈水合生产丙烯酰胺的重要工业酶。通过Discovery Studio 2.5软件对C-末端盐桥耦合定点突变改造的耐热型基因重组腈水合酶NHaseM-TH-SBM（S344K-S346K

【作者】

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陈杰贾旭于慧敏罗晖沈忠耀

【机构】

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清华大学化学工程系生物化工研究所,北京科技大学生物科学与技术系

【出处】

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化工学报

【发表日期】

：

2014年7期

【关键词】

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腈水合酶末端盐桥定点突变反应动力学米氏方程失活动力学 nitrile hydratase terminal salt bridge point-m

【基金项目】

：

国家重点基础研究发展计划项目（2013CB733600）, 国家自然科学基金项目（20976094）

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双亚基腈水合酶是催化丙烯腈水合生产丙烯酰胺的重要工业酶。通过Discovery Studio 2.5软件对C-末端盐桥耦合定点突变改造的耐热型基因重组腈水合酶NHaseM-TH-SBM（S344K-S346K-L347E-N362S-435DT436（＋））进行盐桥网络分析,发现其全局盐桥总数有所下降,但双亚基界面间盐桥数量提高到7个。在重组大肠杆菌中表达了原腈水合酶NHaseM-TH（TH）、盐桥突变酶NHaseM-TH-SB（SB）和盐桥耦合定点突变的重组酶NHaseM-TH-SBM（SBM）,研究了

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