【摘 要】
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目的 探讨反义IDO-AFP基因融合修饰树突状细胞(DC)后,DC通过调控色氨酸代谢达到高效、特异性抗肝癌作用.方法 采用细胞培养方法,从小鼠骨髓中获得DC,用反义IDO核酸和AFP基因
【机 构】
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深圳市宝安区中医院外科,武汉大学人民医院外科
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目的 探讨反义IDO-AFP基因融合修饰树突状细胞(DC)后,DC通过调控色氨酸代谢达到高效、特异性抗肝癌作用.方法 采用细胞培养方法,从小鼠骨髓中获得DC,用反义IDO核酸和AFP基因融合的载体,转染入DC内,检测转染入融合基因DC的对T细胞增殖的影响和体外对肝细胞癌的免疫应答的改变.以51Cr释放法测定细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性.制作小鼠肝癌模型,分别予以反义IDO-AFP修饰的DC、单纯DC、空白对照组进行治疗,检测血清中白细胞介素(IL)-10、干扰素(IFN)-γ水平;CD4、CD8和IFN-γ和IL-10双阳性细胞比例,观察其抑制肿瘤的效果.结果 反义IDO-AFP修饰的DC可激活小鼠脾淋巴细胞;能对肝癌细胞株H22细胞进行特异性杀伤,杀伤率为89.3%,显著高于单纯DC、生理盐水(空白对照组)组的34.7%和8.9%(P均＜0.01)而对艾氏腹水瘤细胞无效;反义IDO-AFP修饰DC组色氨酸含量为(17.8±1.2)μm,而单纯DC组和空白对照组的色氨酸为(6.2±0.6)μm和(5.2±1.2)μm,表明反义IDO-AFP修饰DC可明显增加培养液中的色氨酸.使Thl细胞比例上升,抑制体内肿瘤的生长.结论 反义IDO-AFP基因融合修饰树突状细胞后,DC通过调控色氨酸代谢达到高效、特异性抗肝癌的目的,可成为一种有效的瘤苗.
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