【摘 要】
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目的分析HCV NS5B蛋白以不同HCV型来源的负链3’末端RNA为模板的复制活性,为优化以NS5B为靶点的抗HCV药物模型提供理论依据。方法利用原核表达系统表达HCV NS5B蛋白,Ni-NTA亲
【机 构】
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南华大学肿瘤研究所,中国科学院武汉病毒研究所
【基金项目】
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病毒学国家重点实验室开放研究基金(Ⅲ-2005008)
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目的分析HCV NS5B蛋白以不同HCV型来源的负链3’末端RNA为模板的复制活性,为优化以NS5B为靶点的抗HCV药物模型提供理论依据。方法利用原核表达系统表达HCV NS5B蛋白,Ni-NTA亲和层析柱纯化,分别以体外转录的1a(-)3′T RNA、1b(-)3′T RNA和2a(-)3′T RNA为模板进行体外RdRP反应,Northen blot检测RdRp产物。结果当以2a(-)3′T RNA为模板时,RdRp产物量最高,约为以1a(-)3′T RNA为模板时的RdRp产物量的220%,当以1b(-)3′T RNA为模板时产物量最低,约为1a(-)3′T RNA为模板时的RdRp产物量的60%。结论HCV NS5B对不同基因型来源的RNA模板具有选择性。
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