水稻密码子优化的cry2A^＊基因在大肠杆菌中的表达及其表达产物的纯化

来源 :食品科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yin329060357

【摘要】

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通过PCR从克隆载体pUC18-3Z/Cry2A^＊上扩增水稻偏爱型密码子优化的抗虫基因cry2A^＊,经限制性内切酶NdeI和BamHI双酶切定向插入到原核表达载体pET-28a（＋）,成功构建了在表达蛋白的N

【作者】

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秦伟黄昆仑贺晓云李欣许文涛林希瑾罗云波

【机构】

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中国农业大学食品科学与营养工程学院食品生物技术实验室

【出处】

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食品科学

【发表日期】

：

2008年7期

【关键词】

：

抗虫基因 cry2A^＊转基因水稻表达纯化 insecticidal gene cry2A^＊ transgenic rice expression pu

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通过PCR从克隆载体pUC18-3Z/Cry2A^＊上扩增水稻偏爱型密码子优化的抗虫基因cry2A^＊,经限制性内切酶NdeI和BamHI双酶切定向插入到原核表达载体pET-28a（＋）,成功构建了在表达蛋白的N端只带有6个组氨酸标签的融合蛋白表达载体pET-28a（＋）/Cry2A^＊,并转入大肠杆菌BL21（DE3）中。通过对其表达条件进行优化,发现在IPTG浓度为0.05mmol/L、诱导时间为3h、诱导温度为20℃的表达条件下目的蛋白大部分以可溶形式进行表达。采用Ni-NTA亲和柱纯化得到高纯度目

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