新生鼠缺氧缺血性脑损伤后自噬水平变化及其与细胞凋亡的关系

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目的研究新生鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后自噬水平的变化规律,通过对Caspase-3的检测探讨自噬水平变化对细胞凋亡的影响。方法将实验动物分为假手术组、模型组、3-甲基腺嘌呤组及雷帕霉素组,采用Rice法建立HIBD模型,3-甲基腺嘌呤组及雷帕霉素组于造模后0.5h腹腔注射3-甲基腺嘌呤及雷帕霉素。应用免疫组织荧光化学法检测损伤侧大脑海马及皮层组织自噬相关蛋白Βeclin1的表达,Western-blot法检测Βeclin1表达变化规律,免疫组织化学法检测各组Caspase-3的表达。结果免疫组织荧光化学检测结果显示,缺氧缺血性脑损伤后能激活自噬现象发生。Western-blot检测结果显示,HIBD后2hBeclin1蛋白表达开始增加,24h达到高峰,持续到168h。免疫组织化学检测结果显示,3-甲基腺嘌呤组时间点Caspase-3阳性表达显著升高,雷帕霉素组Caspase-3阳性表达显著下降。结论新生大鼠HIBD模型能激活自噬现象发生,自噬水平增高可抑制细胞凋亡,自噬水平降低可增加细胞凋亡。
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