【摘 要】
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采用PCR及T-A克隆技术,从基因组DNA成功克隆三角鲂、太湖鲂舶、太湖鲂舶F2代含完整阅读框的生长激素基因全序列,经测序拼接获得序列全长分别为6009、6042和6058bp,转录单元长
【机 构】
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浙江省淡水水产研究所农业农村部淡水渔业健康养殖重点实验室/浙江省淡水水产遗传育种重点实验室 湖州313001;南京师范大学生命科学学院 南京210023
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采用PCR及T-A克隆技术,从基因组DNA成功克隆三角鲂、太湖鲂舶、太湖鲂舶F2代含完整阅读框的生长激素基因全序列,经测序拼接获得序列全长分别为6009、6042和6058bp,转录单元长分别为2049、2014和2045bp.三种群体的GH基因序列均包括五个外显子、四个内含子及5'侧翼区和3'侧翼区;编码氨基酸序列均为633bp,编码210个氨基酸.对3个目14种鱼类进行同源性及系统发育分析发现,太湖鲂鲌F2代与其祖父母的遗传距离相比亲本较近.另取10尾太湖鲂鲌F2代,对其进行GH基因编码区SNPs筛选,共得到7处SNPs,其中有3处位点的突变导致其氨基酸序列发生了明显的变化;对其蛋白质结构分析发现,突变后的氨基酸残基导致蛋白质二级结构发生改变.我们将该10尾个体按体重分为小个体组和大个体组,经组织表达分析发现,大个体组中的个体具有较高的转录水平,进一步分析发现其氨基酸残基有所不同.
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