【摘 要】
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利用基因克隆和体外转录技术,制备病毒性神经坏死病病毒（Nervous necrosis virus,NNV）核酸检测标准物质。设计NNV RNA2基因的特异性引物,通过RT-PCR获得目的片段并连接至pGEM-T
【机 构】
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广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心、广东省动植物与食品进出口技术措施研究重点实验室
【基金项目】
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国家质检总局科技项目(2016IK047)
论文部分内容阅读
利用基因克隆和体外转录技术,制备病毒性神经坏死病病毒（Nervous necrosis virus,NNV）核酸检测标准物质。设计NNV RNA2基因的特异性引物,通过RT-PCR获得目的片段并连接至pGEM-T载体;采用体外转录方法,获得大量纯品RNA。初步定量稀释至约108 copies/μL,均匀性检验结果显示样品间差异〈5%;稳定性检验表明,室温（20~25℃）保存7 d、冷藏（2~8℃）保存1个月和冷冻（-20℃）保存6个月的含量均无明显变化。采用核酸浓度测定与拷贝数换算的方法,对转录的RNA片
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