【摘 要】
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目的 探究补体1q/肿瘤坏死因子相关蛋白9(CTRP9)对减轻急性心肌梗死(AMI)后心肌组织纤维化的作用及其机制.方法 构建小鼠AMI模型,使用超声机检测左心室射血分数(LVEF)评估心脏功能,应用免疫荧光染色检测 α-SMA/Vimentin双染阳性细胞、心肌组织不同区域CTRP9表达情况,应用ELISA试剂盒检测小鼠血清CTRP9、转化生长因子(TGF)-β1含量,通过Masson染色检测小鼠心肌纤维化情况,Western Blotting检测心肌组织胶原蛋白Ⅰ、TGF-β1、蛋白激酶A(PKA)、
【机 构】
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710038 西安,空军军医大学第二附属医院肾脏内科;710032 西安,空军军医大学第一附属医院心血管外科;710032 西安,空军军医大学第一附属医院老年病科
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目的 探究补体1q/肿瘤坏死因子相关蛋白9(CTRP9)对减轻急性心肌梗死(AMI)后心肌组织纤维化的作用及其机制.方法 构建小鼠AMI模型,使用超声机检测左心室射血分数(LVEF)评估心脏功能,应用免疫荧光染色检测 α-SMA/Vimentin双染阳性细胞、心肌组织不同区域CTRP9表达情况,应用ELISA试剂盒检测小鼠血清CTRP9、转化生长因子(TGF)-β1含量,通过Masson染色检测小鼠心肌纤维化情况,Western Blotting检测心肌组织胶原蛋白Ⅰ、TGF-β1、蛋白激酶A(PKA)、p-PKA表达情况.结果 小鼠AMI后第4天,血清CTRP9水平减低(P<0.001)、TGF-β1水平升高(P<0.001);AMI后第28天,LVEF显著减低(P<0.001),心肌纤维化明显增加(P<0.001),心肌组织TGF-β1水平明显升高(P=0.0025),肌成纤维细胞数量大量增加(P<0.001),PKA活性增强(P=0.0023),胶原蛋白Ⅰ表达明显增加(P=0.0238);敲除CTRP9小鼠AMI组(10/22)较野生型小鼠AMI组(10/27)死亡率增加,但生存曲线未达到统计学差异,心脏收缩功能进一步减低(P=0.0010),心肌纤维化更加严重(P=0.0395),PKA活性受到部分抑制(P=0.0063),TGF-β1(P=0.0126)、胶原蛋白Ⅰ(P=0.0090)表达增加更多;补充rCTRP9后,AMI组小鼠死亡明显减少,但生存曲线未达到统计学差异;心脏收缩功能明显改善(P<0.001);心肌纤维化明显减轻(P<0.001);PKA活性升高(P<0.001),TGF-β1(P<0.01)、胶原蛋白Ⅰ表达减少(P<0.01),应用PKA抑制剂H-89阻断后,CTRP9的心肌保护作用被阻断.结论 CTRP9通过PKA通路明显减轻AMI小鼠心肌组织纤维化和改善心脏功能.
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