【摘 要】
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目的：利用原核表达系统融合表达人水通道蛋白4（ AQP4）胞外区，并进行纯化及鉴定。方法：根据大肠埃希菌密码子偏嗜性及后续实验需要设计并人工合成AQP4胞外区序列，退火形成双链后克隆
【机 构】
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郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室,河南省医药科学研究院神经免疫学研究室,郑州市神经免疫学重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目30570625,河南省省属科研单位社会公益项目预研专项资金资助项目
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目的：利用原核表达系统融合表达人水通道蛋白4（ AQP4）胞外区，并进行纯化及鉴定。方法：根据大肠埃希菌密码子偏嗜性及后续实验需要设计并人工合成AQP4胞外区序列，退火形成双链后克隆至pET32 a （＋）载体，构建原核重组表达质粒，转化大肠杆菌BL21（DE3），IPTG诱导表达。表达的融合蛋白经Ni2＋亲和层析柱纯化后，进行SDS-PAGE和Western blot 鉴定。结果：重组表达质粒经双酶切和测序鉴定构建正确；表达的融合蛋白pET32a（＋）A-QP4胞外区相对分子质量约为26000，可与鼠抗
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