【摘 要】
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鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)是引起鸭、鹅、火鸡等家禽传染性败血症及浆膜炎的主要病原。目前主要通过基因缺失及基因回补的方法对鸭疫里默氏杆菌的基因功
【机 构】
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四川农业大学动物医学院预防兽医研究所; 四川农业大学动物医学院禽病防治中心; 四川省动物疫病与人类健康四川省重点实验室;
【基金项目】
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国家自然科学基金(No.31772772);四川省国际科技合作与交流研究计划(No.16GH0030)资助~~
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鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)是引起鸭、鹅、火鸡等家禽传染性败血症及浆膜炎的主要病原。目前主要通过基因缺失及基因回补的方法对鸭疫里默氏杆菌的基因功能进行研究。然而,目前使用的穿梭质粒pLMF03存在结合转移效率低,酶切位点少等缺陷,不能用于所有鸭疫里默氏杆菌基因的回补。为解决这一问题,本研究将结合转移位点oriT、鸭疫里默氏杆菌复制起始基因pRA0726 ori、高表达启动子基因及多种酶切位点逐一克隆至质粒pPM5,构建了新的穿梭质粒pFY02。结果表明,该质粒能够稳定存在于鸭疫里默氏杆菌,且具有较高的结合转移效率。通过回补鸭疫里默氏杆菌tonB2基因缺失株表明,该质粒可用于鸭疫里默氏杆菌基因的回补。总之,本研究构建的穿梭质粒pFY02更加完善了用于鸭疫里默氏杆菌基因回补的材料。
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