【摘 要】
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目的探讨转化生长因-β1(TGF-β1)刺激大鼠心肌成纤维细胞活化过程中DNA甲基化转移酶3A(DNMT3A)的表达变化情况。方法将30只雄性SD大鼠处死,取大鼠心肌组织,以组织块酶消化法
【机 构】
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安徽医科大学第二附属医院心胸外科; 安徽医科大学心血管病研究中心;
【基金项目】
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安徽高等学校省级自然科学研究重点项目(No KJ2011A175);安徽省自然科学基金项目(No 1308085MH117,1408085MH175)
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目的探讨转化生长因-β1(TGF-β1)刺激大鼠心肌成纤维细胞活化过程中DNA甲基化转移酶3A(DNMT3A)的表达变化情况。方法将30只雄性SD大鼠处死,取大鼠心肌组织,以组织块酶消化法分离细胞,通过差速贴壁离心法收集、培养大鼠心肌成纤维细胞。模型组的心肌成纤维细胞分别给予TGF-β1 1、5、10μg·L-1,建立体外心肌成纤维细胞活化模型。MTT法检测细胞增殖活性,酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清液胶原含量,Western blot法检测DNMT3A和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的蛋白表达。结果与正常对照组相比较,模型组TGF-β1刺激细胞12、24、48 h后,血清中I型胶原和III型胶原的含量明显增高,细胞增殖活性明显增强,Western blot检测显示模型组DNMT3A和α-SMA的表达明显高于正常对照组。结论心肌纤维化的形成可能与DNMT3A表达上调有关,潜在的分子作用机制有待于进一步研究。
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