目的 探讨体外bcl-2反义寡核苷酸(AODN)对人卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞顺铂(DDP)耐药的逆转作用.方法以卵巢癌DDP耐药细胞株A2780/DDP为模型,实验组以脂质体为载体,分别将bcl-2 AODN、bcl-2正义寡核苷酸(SODN)、bcl-2随机寡核苷酸(RODN)分别转染到A2780/DDP细胞内;阴性对照组细胞以同体积的培养基转染;空白对照组细胞不转染.采用计数法检测细胞增殖变化;RT-PCR技术检测bcl-2 mRNA表达水平;免疫荧光技术检测bcl-2蛋白表达.将DDP作用于细胞,观察实验组、阴性对照组、空白对照组对DDP敏感性的差异.采用DNA凝胶电泳检测细胞凋亡;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测DDP对细胞的抑制率. 结果实验组转染AODN的A2780/DDP细胞增殖被抑制,细胞倍增时间延迟了24 h;A2780/DDP细胞的bcl-2 mRNA及蛋白的表达量下降,16 μg/ml的AODN转染72 h后,bcl-2 mRNA的表达量为0.76±0.01,bcl-2蛋白表达量为171.30±3.09,分别与空白对照组bcl-2 mRNA(1.56±0.03)、bcl-2蛋白(105.34±1.72)的表达量比较,差异均有统计学意义(P<0.01);与相同浓度SODN、RODN转染的A2780/DDP细胞以及阴性对照组A2780/DDP细胞分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05).实验组转染AODN的卵巢癌细胞对DDP的敏感性提高,细胞抑制率为(97.49±1.00)%,与阴性对照组的(3.33±0.17)%比较,差异有统计学意义(P<0.01).结论 AODN可通过下调bcl-2 mRNA及bcl-2蛋白表达水平,抑制细胞的生长,增加细胞对DDP的敏感性,在一定程度上逆转了卵巢癌细胞的耐药性.
bcl-2反义寡核苷酸逆转人卵巢上皮性癌细胞耐药的体外研究
【摘 要】
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目的 探讨体外bcl-2反义寡核苷酸(AODN)对人卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞顺铂(DDP)耐药的逆转作用.方法以卵巢癌DDP耐药细胞株A2780/DDP为模型,实验组以脂质体为载体,分别将bcl-2 AODN、bcl-2正义寡核苷酸(SODN)、bcl-2随机寡核苷酸(RODN)分别转染到A2780/DDP细胞内;阴性对照组细胞以同体积的培养基转染;空白对照组细胞不转染.采用计数法检测细胞增殖变
【机 构】
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430022,武汉,华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科,430022,武汉,华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科,430022,武汉,华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科,430022,
【发表日期】
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2006年41期
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