原核真核双表达加强型绿色荧光蛋白质粒的构建

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将原核启动子Ptrc和加强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因从EGFP原核表达质粒pYA3334-EGFP上切下,然后将其插入至真核表达质粒pVAX1真核启动子Pcmv的下游,构建成具有真核和原核启动子的双表达杂合质粒pVAXD-EGFP, 其长度为3823 bp.将pVAXD-EGFP分别转化鼠伤寒沙门氏菌X4550和转染COS-7细胞,应用流式细胞术、可见光谱扫描、SDS-PAGE测定EGFP原核表达;应用荧光显微镜观察EGFP在COS-7细胞内的表达.重组鼠伤寒沙门氏菌X4550 (pVAXD-EGFP
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