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目的
探讨表皮生长因子(EGF)对U87细胞增殖和侵袭能力的影响及其可能的作用机制。
方法设计合成骨桥蛋白(OPN)特异性siRNA并转染U87细胞株,以下调细胞中OPN的表达。设立空白对照组、EGF组以及siRNA+EGF组。采用实时定量PCR(qPCR)和Western blot方法检测OPN在各组细胞中的表达,以MTT法和Transwell实验分别检测各组细胞的增殖能力和侵袭能力。
结果siRNA可成功转染至U87细胞并抑制OPN的表达,使OPN蛋白的表达水平下降50.7%(P<0.05)。qPCR和Western blot结果显示,与空白对照组比较,EGF组和siRNA+EGF组OPN的表达均增加(均P<0.05),但EGF组表达的上调更显著;与EGF组相比,siRNA+EGF组OPN的表达明显减少(P<0.05)。MTT实验表明,与空白对照组相比,EGF组和siRNA+EGF组的细胞增殖均明显增强(均P<0.05);与EGF组相比,siRNA+EGF组的细胞增殖明显受到抑制(P<0.05)。Transwell实验结果显示,与空白对照组相比,EGF组和siRNA+EGF组的细胞侵袭能力均显著增加(均P<0.05);与EGF组相比,siRNA+EGF组细胞的侵袭能力明显降低(P<0.05)。
结论EGF可通过上调OPN的表达增强胶质瘤细胞的增殖和侵袭能力。