【摘 要】
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肢体内外翻畸形（valgus-varus deformity, VVD）是肉鸡（Gallus gallus）养殖业中最常见的腿病。为了探究VVD相关基因ST3 β-半乳糖苷α-2,3-唾液酸转移酶4（ST3 β-galactoside α-2,3-sialyltransferase 4,ST3GAL4）启动子区甲基化水平与血清碱性磷酸酶（alkaline phosphatase, ALP）活性和基
【机 构】
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河南农业大学动物科技学院/农业农村部畜禽资源(家禽)评价利用重点实验室
【基金项目】
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河南省自然科学基金（222300420458）； 中原学者首席科学家工作室（30601985）；
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肢体内外翻畸形（valgus-varus deformity, VVD）是肉鸡（Gallus gallus）养殖业中最常见的腿病。为了探究VVD相关基因ST3 β-半乳糖苷α-2,3-唾液酸转移酶4（ST3 β-galactoside α-2,3-sialyltransferase 4,ST3GAL4）启动子区甲基化水平与血清碱性磷酸酶（alkaline phosphatase, ALP）活性和基因表达的关系，选用VVD和正常肉鸡检测其血清ALP活性，采用qPCR技术检测ST3GAL4基因在不同组织中的差异表达，筛选差异表达组织，进一步利用亚硫酸氢盐测序法（bisulfite sequencing PCR, BSP）检测ST3GAL4基因在血液和差异表达组织中的甲基化水平。结果表明，VVD组ALP活性显著低于正常组（P＜0.05），腿肌ST3GAL4基因的表达量显著高于正常组（P＜0.05）。甲基化水平检测结果表明：在血液中，VVD组ST3GAL4启动子区总体甲基化水平高于正常组（P=0.051）,CpG25甲基化差异显著（P＜0.05）；在腿肌组织中，VVD组ST3GAL4启动子区总体甲基化水平极显著低于正常组（P＜0.01）,CpG11、CpG14、CpG15甲基化差异达到显著水平（P＜0.05）。ST3GAL4启动子区转录因子预测结果显示：关键位点CpG15可能与转录因子CRE结合蛋白1（cAMP response element binding protein 1, CRE-BP1）、cAMP应答元件结合蛋白（cAMP response element binding protein, CREB）和细胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白（cytoplasmic polyadenylation element binding protein, CPE bind）相结合，关键位点CpG25可能与转录因子特异蛋白1（specificity protein 1, Sp1）和激活蛋白-2α（activator proein-2α, AP-2α）相结合。相关性分析结果表明，血液ST3GAL4启动子区关键位点CpG25甲基化水平和血清ALP活性呈负相关，腿肌组织ST3GAL4启动子区关键位点CpG15甲基化水平和基因表达量也呈负相关。本研究揭示了VVD肉鸡ST3GAL4基因启动子区甲基化水平与血清ALP活性、基因表达水平存在一定联系，为肉鸡抗病育种工作提供参考数据。
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