【摘 要】
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应用组织块培养法和高密度培养、连续传代法建立西农萨能奶山羊乳腺上皮细胞体外培养体系,通过生长曲线绘制、核型分析、免疫荧光染色(角蛋白、上皮膜抗原、波形蛋白、β-酪
【机 构】
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西北农林科技大学动物科技学院陕西省农业分子生物学重点实验室;
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划)(No.2008AA10z135);转基因生物新品种培育重大专项(No.2009ZX08009-162B);公益性行业(农业)科研专项经费项目(No.3-45)资助~~
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应用组织块培养法和高密度培养、连续传代法建立西农萨能奶山羊乳腺上皮细胞体外培养体系,通过生长曲线绘制、核型分析、免疫荧光染色(角蛋白、上皮膜抗原、波形蛋白、β-酪蛋白)、油红染色及β-酪蛋白基因的RT-PCR分析进行培养细胞鉴定。实验结果表明细胞生长曲线为典型的S型,染色体数目众数为60,细胞角蛋白、上皮膜抗原、波形蛋白、β-酪蛋白表达均呈阳性,油红染色后可见细胞质内的脂滴,且细胞表达酪蛋白mRNA。说明运用本方法培养的细胞为正常的乳腺上皮细胞,并具有一定的泌乳功能。
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