【摘 要】
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用含有0.5mmol/L EGTA的Hanks液100ml灌流大鼠肝脏,然后用100U/ml胶原酶溶液100ml循环灌流10min,再用100ml的0.5%胰酶灌流。分离的肝细胞用台盼蓝排斥试验显示87%～89%活率,产
【机 构】
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军事医学科学院毒物药物研究所,军事医学科学院毒物药物研究所
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用含有0.5mmol/L EGTA的Hanks液100ml灌流大鼠肝脏,然后用100U/ml胶原酶溶液100ml循环灌流10min,再用100ml的0.5%胰酶灌流。分离的肝细胞用台盼蓝排斥试验显示87%～89%活率,产率可达4.7×10~8,具有~3H-TdR掺入活性。原代培养3d出现新增殖的肝细胞,20d增殖约5倍,可进行连续传代培养。
Rat livers were perfused with 100 ml of Hanks’ solution containing 0.5 mmol / L EGTA and then perfused with 100 ml of 100 U / ml collagenase solution for 10 min followed by 100 ml of 0.5% trypsin. Isolated hepatocytes with trypan blue exclusion assay showed 87% -89% viability with a yield of 4.7 × 10 -8 with ~ 3H-TdR incorporation activity. Primary cultured 3d appeared new proliferation of hepatocytes, proliferation of about 5 times 20d, for continuous subculture.
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