Cathepsin K在人软骨细胞体外培养去分化过程中的表达研究

来源 :中华创伤骨科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gaolei19890917
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目的 通过基因芯片技术研究在体外培养的去分化人软骨细胞的基因改变,从中筛选出目标基因,并对其在各代软骨细胞中的表达进行研究.方法 取体外培养的P1代和去分化的P4代软骨细胞进行8300点基因芯片的DNA微阵矩杂交,筛选出差异最明显的基因,并通过RT-PCR和Western-blot方法检测各代软骨细胞中该基因的表达水平.结果 体外培养的P1、P4代软骨细胞间共140个基因差异表达,其中Cathepsin K基因表达差异水平最明显,P4与P1的比值平均为29.72,RT-PCR显示在596 bp的条带处,随传代次数增加逐渐增亮,半定量分析P4/P1为3.21,差异有统计学意义(P<0.05).Western-blot检测显示在相对分子质量为40 000的蛋白条带随体外传代蛋白浓度增加,灰度分析P4/P1为3.39,差异有统计学意义(P<0.05).结论 基质降解半胱氨酸蛋白酶Cathepsin K在去分化软骨细胞中表达强烈,提示其与软骨细胞去分化过程中的基质降解有关。

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