牛α1，3-半乳糖转移酶基因部分片段的克隆及无启动子打靶载体的构建

来源 :农业生物技术学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：banbe0602

【摘要】

：

利用La-PCR的方法,从牛的基因组中成功地获得2.4 kb和5.2 kb的扩增产物.其中2.4 kb片段位于5～7外显子之间,包括了完整的第5及第6内含子;5.2 kb片段位于8～9外显子,包括了完整的

【作者】

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陈立栋李雪辉胡宏宇安晓荣林爱星

【机构】

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中国农业大学农业生物技术国家重点实验室

【出处】

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农业生物技术学报

【发表日期】

：

2003年6期

【关键词】

：

牛α1 3-半乳糖转移酶基因克隆无启动子打靶载体生物反应器 α 1 3-galactosyltransferase genegene targetingp

【基金项目】

：

国家高技术研究发展计划(863计划)

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利用La-PCR的方法,从牛的基因组中成功地获得2.4 kb和5.2 kb的扩增产物.其中2.4 kb片段位于5～7外显子之间,包括了完整的第5及第6内含子;5.2 kb片段位于8～9外显子,包括了完整的第8内含子.2个片段分别克隆于pCR-XL-TOPO载体.测序结果表明所克隆的两片段均为牛α1,3半乳糖转移酶基因的基因组序列.2.4 kb和5.2 kb的两个片段分别作为打靶载体的5'、3'同源臂构建了无启动子打靶载体TOPO-IRESneo7.6.电击转染牛胎儿成纤维细胞以期敲除牛的α

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