研究华蟾毒精（CBG）对骨癌痛大鼠的镇痛作用及毒蕈碱受体M4亚型（M4 mAChR）在其中的作用与机制。
方法100只雌性SD大鼠采用随机数字表法分为5组（n=20）：假手术组（S组）、胫骨癌痛组（A组）、生理盐水+ CBG溶剂组（ANS组）、生理盐水+ 1 mg/kg CBG组（ANC组）、Tropicamide + 1 mg/kg CBG组（ATC组）。S组左胫骨上端骨髓腔各注入Hank′s液10 μl，A组、ANS组、ANC组、ATC组左胫骨上端骨髓腔各注入Walker256癌细胞悬液10 μl。模型制备成功后第9天，ANS组、ANC组、ATC组鞘内分别注射生理盐水15 μl、生理盐水15 μl、10 nmol M4 mAChR阻断剂Tropicamide，10 min后，ANS组、ANC组、ATC组腹腔分别注射CBG溶剂、1 mg/kg CBG、1 mg/kg CBG。造模前（T0）每组大鼠测3次取平均值作为其基础痛阈，腹腔给药前20 min（T1），给药后10 min（T2）、30 min（T3）、60 min（T4）、90 min（T5）、120 min（T6）分别测定其痛阈值。并且给药后60 min取L4~L6左侧脊髓背角和背根神经节（DRG），采用蛋白质印迹法（Western blot）检测钙离子/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱa（CaMKⅡa）、磷酸化钙离子/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱa（pCaMKⅡa）表达情况。
结果在T1~T6各时间点，S组机械痛阈值分别为（8.69±0.45）、（8.63±0.44）、（8.65±0.39）、（8.84±0.23）、（8.80±0.14）、（8.75±0.14）g，A组分别为（6.37±0.30）、（6.42±0.13）、（6.29±0.17）、（6.25±0.22）、（6.34±0.33）、（6.36±0.34）g，差异均有统计学意义（t=-16.41、-23.47、-30.25、-17.35、-19.52、-22.56，均P<0.01）；在T3~T 5各时间点，ANS组机械痛阈值分别为（6.42±0.32）、（6.39±0.34）、（6.26±0.32）g，ANC组分别为（7.29±0.34）、（7.81±0.15）、（7.54±0.19）g，差异均有统计学意义（t=13.52、14.22、17.33，均P<0.01）；在T3~T 5各时间点，与ANC组比较，ATC组机械痛阈值下降，分别为（6.55±0.23）、（6.84±0.46）、（6.80±0.43）g，差异均有统计学意义（t=-12.69、-11.26、-10.33，均P<0.01）。T4时间点，各组大鼠脊髓背角pCaMKⅡa表达水平分别为（0.67±0.05）、（1.64±0.12）、（1.57±0.14）、（0.78±0.09）、（1.39±0.11），DRG表达水平分别为（1.65±0.39）、（3.59±0.17）、（3.43±0.32）、（2.17±0.34）、（2.95±0.23），差异均有统计学意义（F=179.89、198.76，均P<0.01）；与S组比较，A组pCaMⅡa表达上调；与ANS组比较，ANC组pCaMKⅡa表达下调；与ANC组比较，ATC组pCaMKⅡa表达上调；CaMKⅡa在脊髓背角及DRG内各组表达差异均无统计学意义（F=1.25、2.79，均P>0.05）。
结论M4 mAChR阻断剂参与介导华蟾毒精缓解骨癌痛大鼠的痛觉过敏，其机制可能与pCaMKⅡa/CaMKⅡa信号通路有关。