【摘 要】
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根据GenBank中的羊口疮B2L基因序列,设计合成2对引物,通过对环介导等温扩增条件的优化,敏感性、特异性试验,成功建立了羊口疮LAMP诊断方法。敏感性结果显示,建立的LAMP诊断方
【机 构】
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贵州省畜牧兽医研究所,贵州省普安县农业局,贵州省黔西南州动物疫病预防控制中心,贵州省普安县万象生态农业综合开发有限公司
【基金项目】
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黔西南州种草养羊产业发展省州科技合作专项项目2012 [3]号.贵州省农业科技攻关项目黔科合NY字(2009) 3089号.
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根据GenBank中的羊口疮B2L基因序列,设计合成2对引物,通过对环介导等温扩增条件的优化,敏感性、特异性试验,成功建立了羊口疮LAMP诊断方法。敏感性结果显示,建立的LAMP诊断方法最低核酸检测量为0.50pg/L,而PCR诊断方法最低核酸检测量为50pg/L,特异性结果显示,羊大肠杆菌、羊沙门氏菌、口蹄疫病毒、山羊痘病毒的扩增结果均为阴性。对195份自然感染病羊样品的检测结果表明,该LAMP方法检测结果与PCR检测结果符合率为96.4%。整个扩增反应可在30min内完成,结果肉眼可见,为羊口疮的现场快速诊断提供了一种简便快速的方法,从而满足基层现场快速检疫需要。
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