应用等位基因多重聚合酶链反应检测结核分枝杆菌katG基因315位点突变

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目的建立等位基因特异性多重聚合酶链反应(MASPCR)方法,检测katG基因315位点的突变。方法根据结核分枝杆菌的katG序列,分别设计出3条特异性寡聚核苷酸引物,采用MASPCR技术,检测katG基因315位点的突变以间接判断对异烟肼的耐药性。同时与常用的RFLP方法进行比较。结果对临床分离异烟肼敏感株(30株)及异烟肼耐药株(54株)分别采用MASPCR和PCRRFLP方法同时进行扩增,敏感株均未见有突变。MASPCR对耐药株的检出率为88.9%(48/54)。对于RFLP方法无法检出的S315N类型的突变亦能检出。结论MASPCR方法有较高的敏感性及特异性,快速、经济、操作简便。
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