【摘 要】
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目的:建立慢病毒介导的livin基因沉默系统,探讨其对肺癌细胞凋亡的影响.方法:Livin shRNA慢病毒感染肺腺癌细胞株SPC-A1沉默livin基因表达.应用PI染色经荧光镜下观察SPC-A1细
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目的:建立慢病毒介导的livin基因沉默系统,探讨其对肺癌细胞凋亡的影响.方法:Livin shRNA慢病毒感染肺腺癌细胞株SPC-A1沉默livin基因表达.应用PI染色经荧光镜下观察SPC-A1细胞凋亡形态,流式细胞术检测SPC-A1细胞凋亡率及亚二倍体峰形成,Real-time PCR及Western blotting方法检测livin和caspase 3表达的改变.结果:livin基因在肺腺癌细胞株SPC-A1中持续高表达.经慢病毒介导shRNA使livin基因表达沉默后,镜下可见肺腺癌细胞出现典型凋亡形态特征,流式细胞术检测出现亚二倍体峰,细胞凋亡率较空白对照及阴性病毒对照细胞明显增加(8.21% vs 0.08%, 0.13%;P<0.05),RT-PCR及Western blotting 检测结果显示,caspase 3 mRNA表达无改变,但cleaved-caspase 3蛋白表达上调.结论:慢病毒载体介导的shRNA能抑制肺腺癌细胞株SPC-A1中livin基因的表达,从而促进SPC-A1细胞凋亡.
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