【摘 要】
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目的克隆人细胞角蛋白18基因(C K18)编码区并构建重组真核表达载体pEBFP-C K18,研究其对Hep G2肝癌细胞增殖和迁移的影响。方法以Hep G2细胞mRNA为模板,用RT-PCR扩增CK18基因
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(NO:81560390);贵州省科学技术基金资助项目(NO:黔科合基础[2017]1147)
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目的克隆人细胞角蛋白18基因(C K18)编码区并构建重组真核表达载体pEBFP-C K18,研究其对Hep G2肝癌细胞增殖和迁移的影响。方法以Hep G2细胞mRNA为模板,用RT-PCR扩增CK18基因蛋白编码区,并插入真核表达载体pEBFP-C1中,构建重组质粒pEBFP-CK18。重组质粒用脂质体法稳定转染Hep G2细胞,并用G418筛选出稳定表达外源蛋白CK18的单克隆稳转肝癌细胞株,蛋白免疫印迹检测胞内蛋白表达情况。实时无标记细胞分析和细胞划痕-愈合实验分别评估稳转细胞的增殖和迁移能力。结
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