亚精胺对日本血吸虫成虫培养细胞核仁组织区相关嗜银蛋白的影响

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目的 以日本血吸虫培养细胞核仁组织区相关嗜银蛋白(Argyrophilic nucleolar organizer regionassociated proteins,AgNORs)为评价指标,探讨亚精胺(Spermidine,Spd)对培养细胞的促增殖作用.方法采用联合法将虫龄为24d的日本血吸虫成虫细胞接种于小盖玻片上,培养于常规培养基中.接种后第3天,随机分为实验组和对照组.将实验组细胞用无血清培养基配制的终浓度为75 μmol/L的Spd处理48 h,对照组细胞则用不含Spd的无血清培养基处理,时间相同;PBS清洗3次后换用常规培养基继续培养.于第7、14、21、28、35天分别对培养细胞进行AgNORs染色.使用HPIAS-2000图像分析系统,计算培养细胞核内AgNORs颗粒数及平均吸光值,并作统计分析.结果经Spd处理,各实验组培养细胞AgNORs着色明显深于对照组;但随着培养时间的延长,实验组与对照组细胞着色均逐渐变浅.各实验组细胞AgNORs颗粒数目与平均吸光值高于对照组,二者比较差异有统计学意义(u7=50.95、43.78;u14=55.23、43.54;u21=36.65、32.25;u28=31.6、32.95;u35=28.86、9.54;P<0.01).各实验组AgNORs吸光值两两比较,除第7天与第14天之间差异无统计学意义外(q=0.008 058,P>0.05),其余差异都有统计学意义(P<0.01).结论Spd具有促进日本血吸虫培养细胞增殖的能力,每周用Spd处理培养细胞1次,能更大限度地促进血吸虫培养细胞的生长。

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