【摘 要】
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目的用人乳头瘤病毒主要衣壳蛋白(HPV L1)C-末端保守序列多肽制备抗HPV L1单克隆及多克隆抗体,并对所制备的抗体的检测能力进行鉴定,同时比较其与购买的单克隆抗体的检测能力
【机 构】
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三峡大学医学院,三峡大学第二临床医学院妇产科,三峡大学第一临床医学院妇产科,
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目的用人乳头瘤病毒主要衣壳蛋白(HPV L1)C-末端保守序列多肽制备抗HPV L1单克隆及多克隆抗体,并对所制备的抗体的检测能力进行鉴定,同时比较其与购买的单克隆抗体的检测能力。方法将HPV L1 C-末端一段30个氨基酸长度的保守序列多肽与载体蛋白KLH偶联,免疫小鼠及兔,制备抗多肽单克隆及多克隆抗体。分别采用ELISA、Western blot、免疫组织化学等方法检测所制备的多肽抗体多种型别HPV L1的反应性,并与市售的多价抗HPV L1单克隆抗体进行比较,以确定多肽抗体的检测能力。结果免疫小鼠及兔后得到的鼠单克隆抗体及兔多克隆抗体,其效价分别在1∶320 000以上及1∶64 000以上;用ELISA方法检测3种抗体对HPV阳性细胞提取蛋白及L1重组蛋白的反应性,均有阳性反应;用Western blot方法检测抗体对HPV阳性细胞提取蛋白及L1重组蛋白的反应性,均出现明显条带,但我们制备的鼠单克隆抗体与细胞提取蛋白未见明显条带;用免疫组织化学方法检测HPV阳性细胞,3种抗体均呈现阳性反应。结论 HPV L1 C-末端保守序列可以诱导产生抗HPV L1单克隆或多克隆抗体,可以检测出多型别的HPV L1,其检测能力与市售的多价抗HPV L1单克隆抗体基本相当。
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