胃癌相关基因GCRG213在大肠杆菌中的表达及重组蛋白纯化

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目的利用硫氧还蛋白融合表达系统表达胃癌相关基因GCRG213,制备高纯度的GCRG213蛋白.方法采用PCR技术从pGEM-T质粒上扩增出含完整ORF的GCRG213 cDNA序列,将其克隆至硫氧还蛋白融合表达载体pET102/D-TOPO中,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达融合蛋白,凝胶回收目的蛋白.结果 SDS-PAGE证实在大肠杆菌中高效表达出相对分子量约29.4kD的Thioredoxin/GCRG213融合蛋白.薄层凝胶扫描显示,其表达量占菌体总蛋白的28.7%.经凝胶回收法得到纯度近1
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