应用超声波法制备生大黄灭菌溶液,观察其在脓毒症大鼠中的效果,探讨其对于炎症反应的作用机制,为急危重患者救治提供新措施。
方法首先以超声法萃取制备生大黄灭菌液。其次将50只雄性SD大鼠随机(随机数字法)分为盲肠结扎穿刺(CLP)组、生大黄组,用盲肠结扎穿刺法模仿中度脓毒症,分别予生理盐水、生大黄灭菌液灌胃,观察7 d生存率。再次将54只大鼠随机(随机数字法)分为3组:假手术组、CLP组、生大黄组,CLP组和生大黄组进行脓毒症造模,术后分别予生理盐水、生大黄灭菌液灌胃。分别在12 h、24 h、48 h每组随机挑选6只大鼠处死,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)、高迁移率族蛋白1(high mobility group box-1 protein,HMGB1)水平。用蛋白质印迹法检测小肠组织HMGB1、糖基化终产物受体(receptor for advanced glycation endproducts,RAGE)、核因子-κB(NF-κB) P65蛋白。
结果超声萃取法蒽醌成分含量高于于传统水煎法(P<0.01)。生大黄组大鼠7 d生存率(76%)高于CLP组(48%)(P<0.05)。生大黄组和CLP组大鼠血清TNF-α、HMGB1水平高于假手术组(P<0.05);生大黄组TNF-α水平在各个时间点低于CLP组;在术后12 h生大黄组血清HMBG1水平与CLP组差异无统计学意义(P>0.05),在术后24 h、48 h,生大黄组血清HMBG1水平低于CLP组(P<0.05)。48 h生大黄组和CLP组小肠组织HMGB1、RAGE蛋白水平、NF-κB活化程度高于假手术组(P<0.01),上述指标CLP组高于生大黄组(P<0.05)。
结论本研究提取出的生大黄灭菌液能下调炎症因子水平,调控炎症反应,提高脓毒症大鼠的生存率。