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目的
研究下调DNA结合抑制蛋白-1(ID-1)对肝癌HuH-7细胞侵袭、迁移和分泌免疫抑制因子的影响。
方法Realtime PCR和Western印迹方法检测ID-1在人肝癌HuH-7、MHCC97H、SNU-449细胞和正常肝L-02细胞中的表达差异。在HuH-7细胞中转染ID-1 siRNA,Transwell小室测定侵袭和迁移,ELISA法检测细胞分泌IL-6、IL-1β水平,Western印迹检测细胞中MMP-2、MMP-9、NF-κBp65蛋白水平。使用NF-κB激活剂处理转染ID-1 siRNA的HuH-7细胞,检测细胞侵袭、迁移和细胞分泌IL-6、IL-1β水平。
结果人肝癌HuH-7、MHCC97H、SNU-449细胞中ID-1水平高于正常肝L-02细胞,并且肝癌HuH-7细胞中ID-1表达水平最高。转染ID-1 siRNA后的HuH-7细胞侵袭、迁移能力下降,细胞分泌的IL-6、IL-1β减少,细胞中MMP-2、MMP-9、NF-κBp65蛋白水平降低。NF-κB激活剂逆转ID-1 siRNA对HuH-7细胞侵袭、迁移和分泌IL-6、IL-1β的影响。
结论下调ID-1通过抑制NF-κB信号激活降低肝癌HuH-7细胞侵袭、迁移和分泌免疫抑制因子的能力。