背景:作者在前期研究中发现鼠神经生长因子具备诱导脐血间充质干细胞向神经元样细胞分化的能力,为进一步探讨提高诱导效率的方法,拟尝试使用多种细胞生长因子进行联合诱导。目的:探讨鼠神经生长因子联合脑源性神经营养因子在体外条件下对人脐血间充质干细胞向神经元样细胞诱导分化的作用。方法:复苏获赠的原代人脐血间充质干细胞并进行体外扩增培养,取第5代脐血间充质干细胞分为5组,其中前4组为预诱导组,在加入成纤维生长因子和表皮生长因子预诱导24 h后,再用鼠神经生长因子、脑源性神经营养因子及二者联合对脐血间充质干细胞进行诱导,对照组仅使用等量细胞培养基培养;最后一组为非预诱导组,先用细胞培养基培养24 h后,再加入鼠神经生长因子和脑源性神经营养因子进行联合诱导。倒置显微镜下观察诱导后细胞形态变化,并用免疫细胞化学法检测神经元特异性烯醇化酶、胶质纤维酸性蛋白的表达,实时荧光定量PCR技术检测神经元特异性烯醇化酶、胶质纤维酸性蛋白在mR NA水平的相对表达量。结果与结论:①脐血间充质干细胞形态为大小不一的长梭形、纺锤形,经诱导后细胞胞体逐渐回缩变圆,并向一侧或多侧发出突起,呈现出神经元样细胞改变;②免疫细胞化学及实时荧光定量PCR结果显示各实验组细胞均阳性表达神经元特异性烯醇化酶、胶质纤维酸性蛋白,联合诱导组神经元特异性烯醇化酶、胶质纤维酸性蛋白阳性率及二者mR NA表达量均高于单独诱导组、对照组以及非预诱导组;③鼠神经生长因子和脑源性神经营养因子均能诱导脐血间充质干细胞向神经元样细胞分化,二者在诱导过程中具有协同作用,联合使用能够有效提高诱导效率。