目的了解掌握某幼儿园突发以呕吐为主要症状的不明原因病例的病原学特点,为预防可能的流行提供科学依据。方法收集某幼儿园2010年12月先后出现呕吐症状的3例患者的呕吐物进行病原学检测,包括细菌的常规分离培养及病毒的荧光定量PCR检测和测序分析。结果细菌分离鉴定未发现致病菌。病毒学检测,3例均为诺如病毒核酸阳性,经测序分析为GⅡ.4亚型,确定为病毒感染所致,从而排除了细菌性食物中毒。根据实验室检测结果,进行相应的现场处置,包括餐具、玩具全面消毒,密切接触幼儿回家观察,相关班级隔离,防止该病毒的传播和扩散。结论南京地区存在诺如病毒的威胁,导致该幼儿园幼儿呕吐的病原是诺如病毒。该病原很可能是由一个感染幼儿在幼儿园发病,其呕吐过程中呕吐物随空气传染靠近的两个幼儿所致。而首先发病幼儿的病原从何而来,还需要进一步采集样本进行检测确认。另外,与其他国家和地区一样,GⅡ.4亚型为主要流行亚型,应加强相应的抗病毒健康教育宣传,尤其是保育过程中的预防宣传工作。