【摘 要】
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目的观察针对结缔组织生长因子(CTGF)的小干扰RNA(siRNA)对低氧诱导的人肺成纤维细胞胶原合成的影响。方法应用siRNA表达载体介导的RNA干扰(RNAi)技术,将CTGF-siRNA表达质粒
【机 构】
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四川大学华西医院呼吸内科,四川大学华西医院心血管疾病研究室
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目的观察针对结缔组织生长因子(CTGF)的小干扰RNA(siRNA)对低氧诱导的人肺成纤维细胞胶原合成的影响。方法应用siRNA表达载体介导的RNA干扰(RNAi)技术,将CTGF-siRNA表达质粒稳定转染人肺成纤维细胞MRC-5,并将人肺成纤维细胞在低氧条件下(37℃,5%CO2,1%O2)培养1、2、4、6及12h。采用定量PCR法测定CTGF及Ⅰ型胶原基因表达,并应用Westernblot法检测CTGF及Ⅰ型胶原蛋白表达变化。结果低氧培养1h后,人肺成纤维细胞即可刺激诱导CTGFmRNA表达,其升高水平可持续至6h。而在CTGF-siRNA表达质粒稳定转染的MRC-5细胞内,低氧诱导的CTGF、Ⅰ型胶原基因及蛋白表达均降低(P<0.05)。结论针对CTGF的siRNA在体外可明显抑制低氧诱导的MRC-5肺成纤维细胞的胶原合成。
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