【摘 要】
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为获得有活性的硫化物醌还原酶(sulfide-quinone reductase,SQR)并研究其功能,试验利用常规PCR方法从荚膜红细菌(Rhodobacter ca psulatus)中克隆了SQR基因全长CDS区1284 bp;
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为获得有活性的硫化物醌还原酶(sulfide-quinone reductase,SQR)并研究其功能,试验利用常规PCR方法从荚膜红细菌(Rhodobacter ca psulatus)中克隆了SQR基因全长CDS区1284 bp;成功构建了SQR基因的原核表达载体pRSETA-SQR,并转入大肠杆菌中进行诱导表达.SDS-PAGE和Western blotting结果显示,SQR融合蛋白成功表达,在37℃条件下,0.4 mmoL/L IPTG诱导表达6h,50 ku的SQR融合蛋白表达量最高.可溶性分析结果表明,SQR重组蛋白以包涵体形式存在,经过纯化、复性后得到较高纯度的SQR活性蛋白.蛋白活性分析结果表明,该酶具有明显的消化底物decyl-UQ的能力,测定其酶活Km值约为4.
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