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在pH为4.6~5.0的BR缓冲溶液中,甲氨蝶呤(MTX)能与T1(Ⅲ)反应形成3:1的螯合物,此时将引起共振瑞利散射显著增强并出现新的RRS光谱,最大散射波长位于335nm处,另在366nm处有另一较强的散射峰.在0.010-2.5μg/mL范围内散射强度(△I)与MTX浓度成正比.方法具有高灵敏度,对MTX的检出限为3.1ng/mL,方法也有良好的选择性.据此发展了一种灵敏、简便和快速测定痕量MTX的新方法,并可用于人血清和尿液中MTX测定.