【摘 要】
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比较了化学裂解与酶裂解相结合法、氯化苄法、CTAB法、改良CTAB法、MP土壤试剂盒法和植物试剂盒法6种提取草菇培养料总DNA的方法.结果表明:不同方法的A260/A280比值有较大差
【机 构】
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吉林农业大学,上海市农业科学院食用菌研究所,江苏省农业科学院蔬菜研究所
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比较了化学裂解与酶裂解相结合法、氯化苄法、CTAB法、改良CTAB法、MP土壤试剂盒法和植物试剂盒法6种提取草菇培养料总DNA的方法.结果表明:不同方法的A260/A280比值有较大差异,其中化学裂解与酶裂解相结合法提取DNA的产量最高,而新型植物基因组DNA提取试剂盒提取培养料DNA的产量最低,分别为(2372.72+28.85) μg/g和(87.67+2.04) μg/g.采用真菌、细菌及放线菌特异性引物进行PCR扩增,结果表明,除氯化苄法没有扩增出目的条带外,其余方法均能扩增出目的条带,说明其均能从草菇培养料中同时有效地提取真菌、细菌和放线菌总DNA.综合评价了各方法的DNA产量、纯度、PCR扩增效果、试验时间、费用成本5个指标,其中采用化学裂解与酶裂解相结合法提取出的DNA产量最高,但所用时间较长；MP土壤试剂盒提取的DNA纯度最高、所需时间较短,但成本较高.
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