【摘 要】
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目的 构建DDX46基因低表达慢病毒载体,并检测其在人膀胱癌细胞中的表达效果,为DDX46基因在人膀胱癌细胞中的研究奠定基础。方法 应用实时荧光定量检测5637细胞和T24细胞中DDX
【机 构】
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中南大学湘雅医学院附属海口医院中心实验室,中南大学湘雅医学院附属海口医院泌尿外科
【基金项目】
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国家自然科学基金(项目编号:81460450);海口市重点科技资助项目(项目编号:2012-073);海南省自然基金项目(项目编号:813256);海南省重点科技项目(项目编号:ZDXM2014076);海南省社会发展科技专项(项目编号:SF201409)
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目的 构建DDX46基因低表达慢病毒载体,并检测其在人膀胱癌细胞中的表达效果,为DDX46基因在人膀胱癌细胞中的研究奠定基础。方法 应用实时荧光定量检测5637细胞和T24细胞中DDX46 mRNA表达水平,以寻找合适的细胞系进行实验。分别以DDX46基因序列和普适型阴性序列为模板,设计合成靶点序列,并合成寡核苷酸双链,定向克隆到慢病毒质粒GV115,合成重组质粒shDDX46和shRNA,分别称之为实验组和对照组。将不同重组质粒与pHelper1.0和pHelper2.0分别转染293T细胞以包装成慢病
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