【摘 要】
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目的：构建含有胶原蛋白基因的原核表达载体pET32a-CP6,并转入大肠杆菌BL21（DE3）中进行高效表达,为获得大量可溶的胶原蛋白肽提供可靠依据。方法：将重组表达载体pET32a-CP6转化到
【机 构】
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吉林农业大学生命科学院生物物理实验室
【基金项目】
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吉林省自然科学基金项目资助课题（20070207）,高等学校博士学科点专项科研基金资助课题（2009222311001）
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目的：构建含有胶原蛋白基因的原核表达载体pET32a-CP6,并转入大肠杆菌BL21（DE3）中进行高效表达,为获得大量可溶的胶原蛋白肽提供可靠依据。方法：将重组表达载体pET32a-CP6转化到大肠杆菌BL21中,以IPTG为诱导剂,对温度、接种量、诱导时机、IPTG诱导浓度等各种发酵参数进行优化,筛选高效表达的发酵条件,并通过Ni-NTA亲和层析进行纯化分析。结果：菌株在37℃、接种量为2%、摇瓶培养约2.5h后,加入终浓度为0.5mmol.L^-1的IPTG,37℃诱导5h,收获的蛋白产量最高为31
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