【摘 要】
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目的:探讨shRNA靶向抑制CD38的方法能否增强抗CD38 CAR-T细胞的抗癌功能.方法:构建shRNA靶向抑制CD38的抗CD38 CAR-T细胞的CAR分子,利用逆转录病毒载体包装成功后转导人原代T细胞,制备CAR-T细胞.实验分为shRNA1 CD38 CAR-T组、shRNA2 CD38 CAR-T组和对照组(shR-NC-CD38 CAR-T细胞).采用qPCR法检测CAR-T细胞CD38 mRNA相对表达水平,计算CAR-T细胞培养0～14d的增殖倍数,CFSE法检测CAR-T细胞与人Bu
【机 构】
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北京中医药大学生命科学学院,北京102488;北京中医药大学生命科学学院,北京102488;深圳北京中医药大学研究院,广东深圳518118
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目的:探讨shRNA靶向抑制CD38的方法能否增强抗CD38 CAR-T细胞的抗癌功能.方法:构建shRNA靶向抑制CD38的抗CD38 CAR-T细胞的CAR分子,利用逆转录病毒载体包装成功后转导人原代T细胞,制备CAR-T细胞.实验分为shRNA1 CD38 CAR-T组、shRNA2 CD38 CAR-T组和对照组(shR-NC-CD38 CAR-T细胞).采用qPCR法检测CAR-T细胞CD38 mRNA相对表达水平,计算CAR-T细胞培养0～14d的增殖倍数,CFSE法检测CAR-T细胞与人Burkitt淋巴瘤细胞Raji-luc或人多发性骨髓瘤外周血B淋巴细胞RPMI-8226-1uc共培养时的增殖情况,荧光素酶化学发光法检测CAR-T细胞在不同效靶比(1:1、1:2、1:4、1:8)时对Raji-luc和RPMI-8226-1uc细胞的杀伤效率,ELISA法检测CAR-T细胞杀伤Raji-luc或RPMI-8226-1uc细胞时上清液中IFN-γ水平,FCM检测CAR-T细胞表面耗竭T细胞生物标志物PD-1的表达水平.结果:shR-NC-CD38 CAR、shRNA1-CD38 CAR和shRNA2-CD38 CAR逆转录病毒载体的滴度均为1×107拷贝/mL,转导T细胞后,shR-NC-CD38 CAR-T、shRNA1-CD38 CAR-T和shRNA2-CD38 CAR-T细胞的转导效率(CAR的阳性率)分别为60.3％、67.0％和57.4％.与对照组比较,shRNA2-CD38 CAR-T组细胞中CD38 mRNA的表达水平显著降低(P＜0.01),显示shRNA-CD38 CAR-T细胞构建成功.shRNA2-CD38 CAR-T组细胞在体外培养增殖能力更强(P＜0.05),对2种CD38阳性的肿瘤细胞的杀伤效率更高(均P＜0.05)、IFN-γ释放水平更高(均P＜0.05)、细胞表面PD-1的表达水平更低(P＜0.05).结论:成功构建一种shRNA靶向抑制CD38的抗CD38 CAR-T细胞,其抗癌功能表现出明显的优势.
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目的 探讨循证护理在单纯放疗喉癌患者呼吸道护理中的应用效果及对患者生命质量评分(quality of life,QOL)的影响.方法 选取2018年1月～2019年1月就诊于本院行放疗治疗的喉癌患者共120例作为研究对象,根据就诊先后分为两组,实验组和对照组各60例.对照组治疗期间接受常规护理干预,实验组在此基础上实施循证护理管理,观察比较两组护理效果.结果 两组护理后吞咽功能比较,实验组优于对照组;护理前,两组QOL评分结果比较差异无统计学意义(P>0.05);护理后,实验组QOL评分明显高于对照组;并
目的 探讨良性阵发性位置性眩晕患者诊治费用情况和影响因素.方法 连续收集2019年3～10月我科诊治的312例良性阵发性位置性眩晕患者,采集患者性别、年龄、既往史等基线情况、挂号方式、临床分型、诊疗费用等,以<726.18元人民币为正常诊治费用,≥726.18元为高诊治费用,计算患者诊治费用分布情况.对费用分布情况进行单因素回归,筛选可能危险因素(P<0.1),进行多因素回归分析,比较正常诊治费用组和高诊治费用组患者检查项目区别.结果 312例患者中男性103例,女性209例,年龄61.22±9.53岁,
目的 通过分析耳鼻咽喉头颈外科诊疗特点以及医疗纠纷现状,提出针对耳鼻咽喉头颈外科医疗纠纷的防御对策及干预措施.方法 对医务人员和患者医疗纠纷的认识等情况以及既往医疗纠纷病例进行调查分析,提出减少或避免耳鼻咽喉头颈外科医疗纠纷的防御对策,并运用于临床.以2016年全年医疗纠纷数量及患者对医疗满意度等指标为对照组,2017年运用干预措施后的相应指标为观察组,分析两组间的数据,观察医疗纠纷干预的效果.结果 得到医方和患方影响耳鼻咽喉头颈外科医疗纠纷的基本情况;实施医疗纠纷干预措施后观察组比较对照组全年的医疗纠纷
突发性耳聋是耳鼻咽喉科最常见的急症之一,患者常出现耳鸣、眩晕和耳闭塞感等症状,听力于数小时或数日内严重减弱甚至丧失,对患者的生活造成困扰.虽然目前发病机制尚未完全明确,但临床治疗日益完善,有效的健康教育可以提高患者对疾病的认知,改善焦虑抑郁等情绪状况,提升自我效能,促进听力恢复.
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