探讨长链非编码RNA LINC01204对膀胱癌细胞磷脂酰肌醇蛋白聚糖-5(GPC5)基因表达的上调作用及对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。
方法实时定量荧光聚合酶链反应(qRT-PCR)检测12例膀胱癌组织及癌旁组织、膀胱癌细胞株BIU-87、T24、J82、5637和正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1中LINC01204的表达量。以表达量最低的膀胱癌细胞为转染对象，用携带LINC01204的慢病毒颗粒转染细胞(观察组)和阴性对照慢病毒颗粒转染细胞(对照组)，qRT-PCR检测两组细胞中LINC01204和GPC5 mRNA表达量。Western blot检测两组细胞中GPC5蛋白的表达。细胞计数试剂盒(CCK-8)、Transwell小室实验分别测定细胞增殖、迁移和侵袭能力。
结果膀胱癌组织中LINC01204表达量(0.773±0.063)明显低于癌旁组织(3.665±0.330)，差异有统计学意义(t＝8.612，P<0.001)。膀胱癌细胞株BIU-87(0.320±0.034)、T24(0.515±0.056)、J82(0.644±0.039)、5637(0.147±0.018)中LINC01204表达水平均低于正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1(1.009±0.077)，差异均有统计学意义(t＝8.160，P<0.001；t＝5.179，P＝0.002；t＝4.221，P＝0.006；t＝10.890，P<0.001)，5637细胞表达量最低。观察组5637细胞中LINC01204表达量(11.000±1.028)明显高于对照组(1.019±0.119)，差异均有统计学意义(t＝9.651，P<0.001)。观察组GPC5 mRNA表达量(4.476±0.347)明显高于对照组(1.046±0.163)，差异均有统计学意义(t＝8.962，P<0.001)。Western blot结果显示，观察组5637细胞中GPC5蛋白表达上调。与对照组相比，观察组转染LINC01204后的5637细胞从第3天(0.686±0.044 vs 0.536±0.026，t＝2.943，P＝0.026)开始增殖能力明显降低。观察组5637细胞迁移数[(118.300±16.260)个]明显低于对照组[(208.200±22.930)个]，差异均有统计学意义(t＝3.198，P＝0.019)。观察组5637细胞侵袭数[(50.390±5.368)个]明显低于对照组[(97.480±15.350)个]，差异均有统计学意义(t＝2.896，P＝0.028)。
结论LINC01204可上调GPC5基因的表达，抑制膀胱癌细胞的增殖、迁移和侵袭，针对LINC01204的靶向治疗有望成为膀胱癌新的基因治疗手段。