目的分析徐州市非结核分枝杆菌菌种、三间分布和耐药性。方法将2013～2017年就诊患者及临床标本作为研究对象,分离出非结核分枝杆菌菌株70例,分析非结核分枝杆菌感染患者的三间分布;对标本进行抗酸染色,PCR-反向点杂交,行分枝杆菌培养,并进行菌群菌种鉴定及耐药性分析,制作耐药性分析统计表。结果非结核分枝杆菌感染率呈上升趋势,绝对增长量中累计增长量与逐年增长量均为正值;非结核分枝杆菌患者的年龄分布呈现双峰分布,即26～<66岁组、≥66岁组感染人数较多;非结核分枝杆菌患者地区之间无明显差异;胞内分枝杆菌感染人数最多,戈登分枝杆菌占比最少;胞内分枝杆菌对各种常见抗结核药物的耐药性较高,鸟分枝杆菌具有普遍耐药性,其他菌种的耐药性同样较高。结论徐州市地区的非结核分枝杆菌感染呈上升趋势,耐药性情况较为严峻,应该给予重视。