两种人粒酶B嵌合基因的表达及对肿瘤细胞的杀伤作用

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：baoyw00

【摘要】

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通过重组PCR构建了抗HER2单链抗体基因、绿脓杆菌外毒素(PE)转位肽序列和活性型粒酶B(GrBa)基因相融合的sFv23e-PE Ⅱ-GrBa基因，以及N端包含PE部分转位肽序列的PE Ⅱ-GrBa基因

【作者】

：

赵晶王智贾林涛张立红金明王成济杨安钢

【机构】

：

第四军医大学生物化学与分子生物学教研室,第四军医大学免疫学教研室

【出处】

：

中国生物化学与分子生物学报

【发表日期】

：

2004年5期

【关键词】

：

表达 HER2 PE 肿瘤细胞杀伤作用肿瘤基因粒酶B 转位肽结构域 granzyme B chimeric protein translocati

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通过重组PCR构建了抗HER2单链抗体基因、绿脓杆菌外毒素(PE)转位肽序列和活性型粒酶B(GrBa)基因相融合的sFv23e-PE Ⅱ-GrBa基因，以及N端包含PE部分转位肽序列的PE Ⅱ-GrBa基因．将这2种粒酶B嵌合蛋白基因瞬时转染或稳定转染HeLa细胞及SKBR-3细胞．通过间接免疫荧光、细胞计数、MTT、ELISA等方法，观察到细胞浆中表达的PE Ⅱ-GrBa蛋白直接杀伤其表达细胞；而sFv23e-PE Ⅱ-GrBa表达后被分泌至细胞外，对产生它的细胞没有杀伤性，但能够特异识别并杀伤HER2

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