E83V对扩展青霉脂肪酶最适作用温度的影响

来源 :微生物学通报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：catchersun

【摘要】

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利用重叠延伸PCR法对扩展青霉碱性脂肪酶(PEL)基因作了体外定点突变,获得了最适作用温度有所提高的突变体.含突变基因的重组质粒pPIC3.5K-lip-E83V在Pichiapastoris GS115中

【作者】

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陈国仁林琳

【机构】

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福建师范大学生物工程学院

【出处】

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微生物学通报

【发表日期】

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2005年1期

【关键词】

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扩展青霉碱性脂肪酶定点突变最适作用温度 Penicillum expansum lipase Site-directed mutagenesis Opt

【基金项目】

：

国家自然科学基金

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利用重叠延伸PCR法对扩展青霉碱性脂肪酶(PEL)基因作了体外定点突变,获得了最适作用温度有所提高的突变体.含突变基因的重组质粒pPIC3.5K-lip-E83V在Pichiapastoris GS115中表达.对突变体表达产物PEL-E83V-GS与野生型表达产物PEL-GS作了比较:前者最适作用温度为45℃,比野生型提高了5℃;其热稳定性基本不变;突变体在37℃下的表达量为188 U/mL,约为野生型的80%.最适作用温度的提高可能是由于83位亲水性的Glu用疏水性的Val取代,增加了脂肪酶表面的疏水

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