【摘 要】
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为解决高密度发酵培养过程中的供氧矛盾,在已经成功构建了λ噬菌体裂解基因(S-RRz)和PHB合成基因(phbCAB)同时有效表达的质粒pTU14的基础上,进一步探索将透明颤菌血红蛋白基
【机 构】
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清华大学化学工程系,生物化工研究所,北京,100084中国科学院上海生物工程研究中心,上海,200233;
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为解决高密度发酵培养过程中的供氧矛盾,在已经成功构建了λ噬菌体裂解基因(S-RRz)和PHB合成基因(phbCAB)同时有效表达的质粒pTU14的基础上,进一步探索将透明颤菌血红蛋白基因(vgb)引入PHB生产的新途径.设计vgb、S-RRz和phbCAB之间的不同克隆连接策略,并选用E.coli JM105为宿主,分别构建三种外源基因同时表达的单质粒基因工程菌E.coli JM105(pTU14-vgb)、双质粒基因工程菌E.coli JM105(pTU14,pWSK129-vgb)和vgb基因整合型单质粒基因工程菌VG1(pTU14),并对其在LBG培养基中进行初步筛选.结果表明,重组菌VG1(pTU14)是一株具有明显生长优势的优选菌株.对VG1(pTU14)在LBG培养基中的补料分批培养进一步表明,该重组菌不仅具有溶氧利用能力高、PHB产量和收率高的特点,还具有可诱导裂解破壁的功能,因此是一株具有光明应用前景的PHB高产基因工程菌.
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