【摘 要】
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为建立以豚鼠为模型动物检测猪圆环病毒2型（PCV2）疫苗效果的方法,本研究以Hartley豚鼠为模型动物,采用原核细胞表达的PCV2 Cap蛋白作为包被抗原,建立了检测PCV2抗体的间接ELISA
【机 构】
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长江大学生命科学学院,长江大学生物医药研究所,青岛易邦生物工程有限公司
【基金项目】
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青岛市战略性新兴产业培育计划项目(13-4-1-9-nsh)
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为建立以豚鼠为模型动物检测猪圆环病毒2型（PCV2）疫苗效果的方法,本研究以Hartley豚鼠为模型动物,采用原核细胞表达的PCV2 Cap蛋白作为包被抗原,建立了检测PCV2抗体的间接ELISA方法,进行PCV2疫苗免疫效果的评价。结果表明,该方法检测未免疫豚鼠血清的OD450nm本底值较低,平均值为0.0673。依据138只未免疫豚鼠的OD450nm平均值确定ELISA临界值:S/P值≥0.2为阳性;S/P<0.1为阴性;0.2>S/P≥0.1为可疑。该检测方法具有很高的特异性和较好的可重复性。采用国内和国外两种PCV2疫苗免疫后,豚鼠血清抗体滴度在4周内达到峰值,两组之间变化趋势高度相关,Pearson相关系数为0.805。该检测方法能够敏感的显示被免疫豚鼠血清抗体从阴性变为阳性的过程。5种不同生产商的PCV2疫苗免疫后测定的S/P比值能够较好的反映血清抗体的变化,各组豚鼠的S/P平均值分别为:0.1645、1.1875、0.5166、1.3559及3.0907。各组的抗体阳性率分别为:40%、40%、20%、100%及100%。以豚鼠为模型动物的间接ELISA方法是一种理想的PCV2疫苗免疫效果评价方法,为疫苗生产厂商PCV2疫苗的开发和养殖企业的疫苗筛选提供了可靠而实用的技术。
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