【摘 要】
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目的：铁死亡可能是高糖高脂诱导胰岛β细胞死亡的重要机制，本研究探讨葡萄籽原花青素提取物（grape seed procyanidin extract，GSPE）对高糖高脂诱导胰岛β细胞铁死亡的作用机制。方法：用25 mmol/L 高糖（high glucose）和200 μmol/L棕榈酸钠（sodium palmitate）干预MIN6细胞建立胰岛β细胞损伤模型，进一步用 0、10、20和30
【基金项目】
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中国博士后科学基金项目（2017M613310XB）； 石河子大学科研项目（ZZZC201704A）；
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目的：铁死亡可能是高糖高脂诱导胰岛β细胞死亡的重要机制，本研究探讨葡萄籽原花青素提取物（grape seed procyanidin extract，GSPE）对高糖高脂诱导胰岛β细胞铁死亡的作用机制。方法：用25 mmol/L 高糖（high glucose）和200 μmol/L棕榈酸钠（sodium palmitate）干预MIN6细胞建立胰岛β细胞损伤模型，进一步用 0、10、20和30 mg/L的GSPE以及Nrf2 siRNA进行干预，用细胞计数试剂盒（The Cell Counting Kit-8 assay， CCK8）检测细胞活性，用试剂盒检测细胞内谷胱甘肽（glutathione， GSH）、丙二醛（malonaldehyde， MDA）、活性氧（reactive oxygen species， ROS）水平，用Western Blot检测核转录因子E2相关因子2（nuclear factor erythroid 2-related factor 2， Nrf2）、血红素氧化酶1（heme oxygenase-1， HO-1）、醌氧化还原酶1（NADPH: quinone oxido-reductase-1，NQO1）、铁代谢指标转铁蛋白受体1（transferrin receptor protein 1， TfR1）、二价金属离子蛋白转运体（divalent metal transporter 1， DMT1）、铁蛋白（ferritin），铁死亡的指标蛋白溶质载体家族7成员11（solute carrier family 7 member 11， SLC7A11）、谷胱甘肽过氧化物酶4（glutathione peroxidase 4， GPX4）、酰基合成酶长链家族成员4（acylcoa synthetase long-chain family member 4， ACSL4）蛋白表达量。结果：与对照组相比，高糖高脂组导致细胞内铁沉积上调TfR1、DMT1、ferritin蛋白表达水平，增加氧化产物MDA、ROS、ACSL4水平，降低GSH水平、下调GPX4、SLC7A11的表达水平而GSPE的干预能够激活Nrf2/HO-1信号通路上调GPX4、SLC7A11蛋白水平，增加GSH水平从而降低MDA、ROS、ACSL4水平和铁代谢指标水平TfR1、DMT1、ferritin来改善高糖高脂诱导的MIN6细胞铁死亡。联合Nrf2 siRNA干预后发现抑制Nrf2后会抑制GSPE的保护作用，抗氧化酶HO-1、GPX4、SLC7A11的表达降低。结论：GSPE可能是通过激活MIN6细胞内的Nrf2信号通路，上调抗氧化酶，减轻高糖高脂诱导的细胞铁死亡，从而提高MIN6细胞存活率。
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