人疱疹病毒6型101K被膜蛋白主要抗原决定簇区原核表达克隆的构建和表达

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目的 构建人疱疹病毒6型(HHV-6)101K被膜蛋白的原核高效表达克隆,并进行原核表达。方法 PCR扩增HHV-6B101K被膜蛋白的主要抗原决定簇区(666~834aa)编码基因片段(nt2347~2853),并导入T载体进行测序,与GenBank中HHV6标准毒株序列比较以进一步鉴定。目的基因及表达载体pThioHisA分别经双酶切后连接,转化宿主菌E.coli BL21,应用PCR法及限制性核酸内切酶双重鉴定原核表达质粒,并经测序证实。IPTG诱导蛋白表达,SD&PAGE电泳鉴定重组蛋白。结果 P
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